豬瘟病毒抗體檢測試劑盒(酶聯免疫法)
包裝規格
96T×1/盒、96T×2/盒、96T×5/盒
原理及用途
本試劑盒由預包被豬瘟病毒重組E2蛋白的酶標板、酶標記物及其他配套試劑組成,應用酶聯免疫法(ELISA)原理檢測豬血清、血漿樣本中豬瘟病毒抗體??捎糜谪i瘟病毒疫苗免疫效果評價及輔助診斷。
試劑盒的組成

樣品準備
1.取動物全血按常規方法制備血清,要求血清清亮,無溶血、無污染。樣品1周內可于2~8℃保存,長期需置-20℃保存。
2.用樣品稀釋液將待檢血清先按40倍稀釋(如在稀釋板中加入195μL樣品稀釋液再加5μL血清,混勻)。陰、陽性對照不用稀釋。
3.濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫使沉淀溶解,然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋成工作洗滌液(如19份蒸餾水或去離子水+1份濃縮洗滌液)。
檢驗方法
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復至室溫。
2.取所需用量酶標板條,設空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。
3.空白對照孔加樣品稀釋液100μL;陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μL;樣品孔每孔加入樣品稀釋液90μL,再加入稀釋后的血清10μL。
注:樣本稀釋比例相當于1:200。
4.混勻,蓋好蓋板膜,置37℃(推薦水?。┍芄夥磻?0分鐘。
5.甩去孔內液體,每孔加350μL工作洗滌液,靜置30秒后棄去,重復洗滌5次,最后用干凈的吸水紙拍干。
6.每孔加酶標記物100μL(空白孔除外)。蓋好蓋板膜,置37℃避光反應30分鐘。
7.洗滌,同步驟5。
8.每孔依次加底物液、顯色液各50μL,混勻,蓋好蓋板膜,置37℃避光反應10分鐘。
9.每孔加終止液50μL,混勻,于450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值(OD值),無參比波長用空白孔調零(即所有孔吸光值減去空白孔吸光值)。
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